自體骨髓單核細胞治療脊柱裂兒童神經後遺症的結果研究摘要

主要要點與發現：

這是少數已發表、針對已經承受脊柱裂後果的孩子進行出生後細胞治療的研究之一，這些後果包括便秘和大便失禁、膀胱無法正常排空或儲尿，以及雙腿無力。越南河內的11名孩子間隔六個月，接受了兩次自體骨髓單核細胞的鞘內輸注。給藥途徑是許多細胞治療診所使用的腰椎注射，但細胞不同。它們是新鮮、未經擴增的骨髓細胞成分，其中間質幹細胞不到千分之一。

結果令人鼓舞，特別是在腸道功能方面，而且沒有發生嚴重不良事件。不過，這項研究沒有對照組、沒有盲化，也沒有統計檢定，而且有幾項測量只在11名孩子中的六或七名身上取得。這是一項有令人期待訊號的安全性研究，並不能證實治療有效。

目的：

評估鞘內輸注自體骨髓單核細胞（BMMNC）的安全性，以及它對脊柱裂兒童腸道、膀胱和腿部功能的影響。

方法：

這是一項開放標籤、無對照的第1期試驗，在Vinmec Times City國際醫院進行，期間為2016年7月至2020年12月，並於2022年7月補登記（NCT05472428）。

符合資格的是男孩或女孩，年齡6個月至15歲，腰椎脊柱裂已經手術閉合。他們必須同時有腸道障礙（便秘或大便失禁）和排尿功能障礙（尿滯留或漏尿）。排除的是脊柱裂位於胸椎、頸椎或其他節段、有凝血障礙、急性或慢性感染、腎衰竭或肝衰竭，或複雜心臟病的孩子。

骨髓在全身麻醉下從兩側前髂嵴抽取。抽取量依體重決定：10 kg以下的孩子每公斤8 mL，較重的孩子為80 mL加上超過10 kg的每公斤7 mL，最多200 mL。單核細胞在無塵室中以密度梯度離心分離，清洗兩次後懸浮於10 mL生理食鹽水中。放行標準為內毒素低於5.0 EU/mL、存活率高於80%，以及黴漿菌檢測陰性。

輸注時，在全身麻醉下於第4和第5腰椎之間置入一支18號脊椎穿刺針。先讓3毫升腦脊髓液流出，再以電動幫浦在30分鐘內輸注10 mL細胞懸浮液。整個流程，包括重新抽取骨髓，在六個月後重複一次。每次輸注後孩子住院72小時，並追蹤12個月。

結果指標包括不良事件、腸道功能（布里斯托糞便分類、羅馬IV標準、肛門直腸壓力檢查）、膀胱功能（症狀、膀胱容積壓力檢查、排尿膀胱尿道攝影）和腿部功能（行走能力、徒手肌力測試）。只使用了描述性統計。

結果：

共治療11名孩子（平均年齡4.5歲，五名男孩和六名女孩）。基準時每個孩子排便都需要協助，十名使用清潔間歇導尿。第一次輸注的平均總劑量為8.39億個單核細胞，第二次為9.59億個，分別含約6,600萬和6,300萬個CD34陽性細胞，存活率高於95%。間質幹細胞只佔輸注細胞的0.083%。

安全性： 沒有發生嚴重不良事件。有七件不良事件被判斷可能與治療有關：頭痛（3）、嘔吐（1）、發燒（1）、尿道疼痛（1）和骨髓抽取處腫脹（1）。全部不需治療就緩解了。

腸道：

• 需要完全協助才能排空腸道（灌腸、腹部加壓或手指挖便）的孩子，基準時為11名中的11名，第一次輸注後為6名，第二次輸注後為3名。最後11名中有8名能自行排便，有2名孩子腸道完全沒有改善。
• 在七名年紀夠大、能夠表達的孩子中，基準時沒有人能感覺到便意。第一次輸注後有5名能感覺到，第二次輸注後有6名。
• 堅硬、顆粒狀的糞便（布里斯托第1型）從10名孩子減少到2名。符合羅馬IV標準的便秘從11名孩子減少到6名。

膀胱： 膀胱功能的變化較小。11名孩子中有10名在開始時使用間歇導尿，到最後同樣這十名仍在使用。沒有孩子開始能自主排尿。漏尿的孩子從9名減少到3名，在七名可評估的孩子中，能感覺到尿意的從1名增加到4名。在接受膀胱容積壓力檢查的七名孩子中，12個月時平均膀胱容量從127.7增加到158.3 mL，最大逼尿肌壓力從32.4降到21.9 cm H2O。壓力下降很重要，因為膀胱壓力高會威脅腎臟。兩名有膀胱輸尿管逆流的孩子中，有一名的逆流消失。膀胱壁外觀異常（10名孩子中的6名）沒有改變。

腿部： 能獨立行走的孩子從6名增加到8名。兩名新能行走的孩子中，有一名在基準時未滿12個月，年紀太小還不會走路。需要踝足矯具的孩子從3名減少到2名，一名孩子的踝關節僵硬沒有改變。在9名可以測試的孩子中，徒手肌力測試腿部肌力正常的從2名增加到3名。

論文有一處不一致。以孩子年齡預期容量百分比表示的膀胱容量下降了，中位數從78.4%降到59.8%，內文也承認這一點。但圖說卻寫它「改善」了。膀胱確實變大了，但比正常成長預期的慢。

結論：

作者的結論是，鞘內輸注自體BMMNC是安全的，並可能改善脊柱裂兒童的腸道、膀胱和動作功能，他們呼籲進行更大型的隨機試驗，「以取得準確的結論」。

這項研究有幾項特點支持這種謹慎。沒有比較組，而且這些是年幼的孩子（平均年齡4.5歲），在這一年中持續成長、發展並接受照護，因此無論如何都會預期有一些變化。論文把幾項變化描述為「顯著」，但並沒有進行統計檢定。評估者和家長都知道已經給予治療。五名孩子缺少肛門直腸壓力檢查（兩名未滿2歲，三名的家長拒絕），四名缺少膀胱容積壓力檢查。文章也附有一則更正聲明（2023年5月），表示為保密而刪除了一處關於某位患者的描述。

背景資訊：

治療費用由慈善機構Kind Heart Foundation支付，家庭不需付費。所有作者都是Vinmec醫療體系或其幹細胞研究所的員工，該研究所也支付了登記和發表費用。

關於選擇鞘內途徑，作者認為放進腦脊髓液的細胞可以直接到達脊髓，而大部分經靜脈給予的細胞會被困在肺部或脾臟。腰椎注射長期以來已用於兒童的化療、巴氯芬（baclofen）給藥和脊椎麻醉。

論文引用了兩份較早的人體報告。2019年Boruczkowski等人的研究讓脊柱裂兒童接受華通氏膠間質幹細胞，報告為安全，並有動作、膀胱、腸道和認知功能的進步。Sharma等人的13名患者系列接受了骨髓單核細胞，沒有併發症。兩者都不是對照試驗。提出的機制（釋放生長因子、減少細胞死亡、新血管生成）都來自動物研究。