- 發表於
- Stem Cell Research & Therapy
- 研究作者
- Yoann Athiel, Laura Cariot, Jean-Marie Jouannic, Corentin Maillet, Vincent Mauffré, Clovis Adam, Hélène Huet, Jérôme Larghero, Justine Nasone, and Lucie Guilbaud.
- 研究日期
- 疾病
- 脊柱裂
主要要點與發現：
這項臨床前研究是在胎羊身上進行的，沒有治療任何孩子。巴黎一個法國團隊正在準備一項胎兒手術計畫，在脊髓脊膜膨出的產前修補中加入臍帶來源間質基質細胞（UC-MSC）。論文報告了他們第一次測試人類UC-MSC（一種廣泛用於臨床細胞治療的細胞類型），把細胞放在胎羊的脊髓上。
接受細胞的小羊在組織學上脊髓保存較好，差異達到統計顯著。牠們的動作也傾向較好，不過動作結果沒有達到統計顯著。只有九隻小羊活產，而且只研究了24小時。所有接受手術的胎羊中將近一半失去。作者表示，轉用到人類必須等待更長期的動物資料。
目的：
在羊模型中，評估一種含人類UC-MSC的纖維蛋白貼片，作為脊髓脊膜膨出胎兒手術修補附加治療的安全性和療效。
方法：
UC-MSC以組織塊培養法從三條人類臍帶分離，臍帶由自然產後的婦女同意捐贈。這些細胞符合國際細胞治療學會的定義。它們貼附於塑膠、呈紡錘形，CD73、CD90和CD105為陽性，CD45、CD11b、CD14、CD34和CD79a為陰性。
貼片在手術前一天以商業纖維蛋白封閉劑套組（Evicel）製作。細胞貼片是把1,700萬個第5代UC-MSC混入纖維蛋白原溶液，再在培養皿中以凝血酶凝固。對照貼片完全相同，但不含細胞。在縮時顯微攝影下，細胞在貼片中自由移動，並在72小時內呈現正常的紡錘形。
在妊娠第75天以手術在胎羊身上製造脊柱缺損（L1至L5椎板切除並移除硬脊膜）。14天後、第89天時進行修補，把貼片放在脊髓上，再縫合胎兒皮膚覆蓋。每天檢查母羊的整體狀況、體溫和傷口癒合。小羊在第142天以剖腹產出。
一位不知貼片類型的獸醫在出生後2小時和24小時，以羊運動評分量表（0代表完全下肢癱瘓，15代表正常）為動作評分。之後小羊被安樂死。所有主要器官都以肉眼和顯微鏡檢查是否有腫瘤。在修補處的L3-L4節段，團隊測量了脊髓面積、灰質面積、每平方毫米灰質中的大型神經元（運動神經元）數量，以及瘢痕組織的厚度。組間以Mann-Whitney U檢定比較。
結果：
在17隻胎羊身上製造了缺損。兩隻在修補前死產，因此有15隻接受修補，8隻用細胞貼片，7隻用對照貼片。修補後，細胞組8隻中失去2隻，對照組7隻中失去4隻。整體胎兒損失率為47%（17隻中8隻）。共有9隻小羊活產，6隻有細胞，3隻為對照。
安全性： 沒有母羊出現發燒或任何其他併發症，也沒有排斥人類細胞的跡象。九隻小羊的修補全部完全癒合，沒有腦脊髓液滲漏，也沒有感染。在放置細胞54天後，臨床檢查或任何器官中都沒有在任何小羊身上發現腫瘤。沒有小羊出現後腦疝脫。
動作：
- 2小時時的運動評分：有細胞組中位數4.0（範圍0至13），無細胞組2.0（0至5），p = 0.32。
- 24小時時的運動評分：有細胞組中位數15.0（範圍2至15），無細胞組2.0（2至5），p = 0.07。
- 能不靠協助站立：有細胞組5隻中3隻，無細胞組3隻中0隻，p = 0.08。
- 肌肉萎縮：有細胞組6隻中1隻，無細胞組3隻中2隻，p = 0.13。
這些差異都沒有達到p小於0.05的一般門檻。至少有一隻治療組小羊只得2分，並不比對照組好。
顯微鏡下的脊髓：
- 大型神經元密度：有細胞組每mm²灰質9.9個，無細胞組6.3個（p = 0.04）。
- 灰質面積：6.2對1.9 mm²（p = 0.01）。
- 脊髓面積：16.1對7.5 mm²（p = 0.02）。
- 脊髓周圍的瘢痕厚度：70.9對253.7微米（p = 0.10）。修補處的瘢痕厚度：691.3對1,684.4微米（p = 0.18）。兩者在有細胞組都較低，但沒有達到顯著。
摘要把運動評分描述為平均值。論文正文中的結果表格則標示為中位數和範圍，這也符合所用的統計檢定。本摘要依照表格。
結論：
作者的結論是，在羊身上搭配胎兒脊髓脊膜膨出手術使用人類UC-MSC是安全的，細胞似乎是透過分泌的物質發揮作用，而不是變成神經組織或擴散到全身，並表示用於人類「將在動物模型中更長期確認這些安全性結果後再考慮」。
作者陳述的限制：
- 每組數量少，可能缺乏統計檢定力。
- 胎兒損失率高，不過和其他大型動物胎兒手術相近。在美國主要團隊對232隻小羊的回顧中，存活率只有43%。
- 由於經費原因，小羊無法存活超過24小時，因此對中期或長期的安全性或功能一無所知。一項在出生後1個月和6個月追蹤的研究正在進行中。
- 效益比團隊先前使用羊UC-MSC的實驗小。他們懷疑是捐贈者之間的差異，因為使用的三條臍帶可能不是保護因子的強力生產者。他們正在測試兩種補救方法：合併多名捐贈者的細胞，以及以效力檢測挑選高分泌的捐贈者。
背景資訊：
作者指出，即使接受胎兒手術，71%的孩子在八歲時無法獨立行走，75%在十歲時需要每天導尿。因此有幾個團隊正在手術中加入細胞。一個使用胎盤來源細胞的加州團隊已經開始人體試驗。這個法國團隊表示，它是唯一使用臍帶細胞的團隊。
在團隊的實驗室研究中，人類UC-MSC會分泌保護神經細胞的腦源性神經營養因子和肝細胞生長因子，以及抗瘢痕因子。在先前一項使用螢光細胞的追蹤研究中，移植的細胞沒有移動到遠端器官。
關於在人體中的安全性，作者引用了兩項大型統合分析，涵蓋UC-MSC用於其他病症的隨機試驗，大多是經靜脈給予成人和兒童，其中短暫發燒是唯一與細胞相關的不良事件，也沒有報告腫瘤。這些資料都不是來自胎兒使用，作者也承認UC-MSC用於胎兒從未被研究過。
這是在其他地方發表的獨立研究的摘要，不是北科治療結果的報告。
