華通氏膠來源間質幹細胞用於裘馨氏肌營養不良症患者的安全性與耐受性：一項第1期臨床研究

主要觀點與發現：

在已發表的研究中，這項規模小的韓國試驗最接近我們診所所用的細胞類型。供者臍帶（華通氏膠）間質幹細胞經靜脈給予患有裘馨氏肌營養不良症（DMD）的男孩。該研究是一項受監管的第1期試驗，經韓國食品藥品安全部批准，在首爾三星醫療中心進行。

共有六名男孩入組，每人接受單次輸注，並追蹤12週。沒有嚴重不良事件，也沒有劑量限制性毒性。第12週的功能測試沒有顯示顯著變化，平均而言，行走能力和運動評分下降。作者表示，結果不足以顯示療效。研究沒有對照組。

目的：

確定EN001的安全性、耐受性和劑量。EN001是一種同種異體早期傳代的華通氏膠來源間質幹細胞產品，用於DMD兒童。療效僅為探索性。

方法：

試驗採用開放標籤劑量遞增（「3+3」）設計。三名男孩接受低劑量，安全審查委員會檢視他們的資料後，另外三名男孩才接受高劑量。劑量限制性毒性定義為輸注後2週內發生的任何3級或以上不良事件。

七名男孩接受篩選，六人於2022年1月至10月入組。納入標準：

• 男性，年齡2至18歲
• 確認有DMD突變並有DMD臨床徵象（近端無力、鴨步步態、高爾斯徵）
• 接受穩定劑量的全身性皮質類固醇，預期在整個期間保持不變

左心室射血分數在超音波心動圖上低於50%、需要呼吸輔助或氣管切開通氣、在過去24週內接受過基因治療或ataluren，或篩檢血液檢驗有臨床意義的異常者，被排除在外。

參與者年齡為10.0至15.8歲，全部仍能行走，基線六分鐘步行距離為231至346公尺，北極星行走評估（NSAA）評分為34分中的8至28分。五人使用地夫可特，一人使用潑尼龍。

一批細胞取自單一捐贈臍帶，在含10%胎牛血清的培養基中擴增三代（約20天），然後以每10 mL袋裝500萬個細胞的量在液態氮中冷凍。放行檢測涵蓋無菌、黴漿菌、內毒素、細胞計數、存活率和表面標記（CD44、CD73、CD90、CD105、CD166為陽性，CD11b、CD14、CD19、CD34、CD45、HLA-DR為陰性）。

低劑量為每公斤50萬個細胞。高劑量為每公斤250萬個細胞，即在mdx小鼠中有效的劑量。實際上，高劑量組的男孩接受了140至201 mL的細胞懸液。

袋裝細胞在37°C水浴中解凍，並在10分鐘內靜脈輸注。預先用藥由研究者自行決定，包括氫皮質酮1至2 mg/kg、勞拉西泮0.1 mg/kg、昂丹司瓊和氯苯那敏。整個過程中監測生命徵象、血氧飽和度和心電圖。

在七次訪視中，每次都記錄不良事件和血清肌酸激酶（CK）。肺量計檢查、以測力計測量的膝伸肌和肘屈肌力量、NSAA和六分鐘步行測試在基線和第12週進行。至第36週的期中資料在補充材料中。計劃追蹤至5年。

結果：

安全性： 12週內共有18次不良事件，低劑量組6次，高劑量組12次。每名男孩至少有一次。全部為1級，無一為嚴重事件。

• 輸注部位發紅、疼痛和腫脹在高劑量組3名男孩中有2名出現，低劑量組無人出現。這些症狀在一天內消退。
• 頭痛出現在3名男孩（1名低劑量，2名高劑量）。一名男孩約有一天被產品的氣味困擾。
• 其他有消化不良、胸痛和壓痛（各一名男孩，低劑量）、骨痛（一名男孩，高劑量）、SARS-CoV-2感染2名男孩，感冒2名。
• 任何一次輸注期間都沒有發燒、血壓改變、皮疹、呼吸困難或休克。
• 到第36週又出現三次1級事件（共21次）。沒有延遲事件被歸因於細胞。
• 四名男孩在6至12個月時的超音波心動圖正常。

運動功能： 12週內，低劑量組NSAA平均評分下降3.33分，高劑量組下降3.00分。個別評分變化為18降到15、25降到17、18升到19、8降到5、28降到22，以及14維持14。一名男孩多了一分，一名維持不變，四名下降，其中一名下降8分。

六分鐘步行距離平均下降13.8公尺（低劑量）和47.4公尺（高劑量）。六名男孩中有一名比基線走得更遠。

膝伸肌力量在低劑量組下降0.70磅，在高劑量組上升0.88磅。六名男孩中有四名有一定程度的增加。肘屈肌力量到第36週為止略有下降。

呼吸： 預測值百分比的用力肺活量上升6.67%（低劑量）和1.00%（高劑量），均無統計顯著性。一名男孩因骨痛無法完成第12週的測試。吸氣和呼氣壓力沒有改變。

CK： 水平到第12週呈下降趨勢，沒有統計顯著性，之後在所有男孩中回到基線。一些男孩在感染COVID-19期間CK急劇上升。作者表示，他們無法判斷這一下降是治療效果還是正常波動。

結論：

作者的結論是，單次靜脈給予這些細胞在六名DMD男孩中安全且耐受良好，而療效只能由更大規模、重複給藥的隨機試驗來確立。他們已登記一項多中心、隨機、雙盲、安慰劑對照的第1/2期試驗（NCT06328725）。

他們列出的限制包括單次劑量、樣本很小、僅12週追蹤（而大多數DMD試驗為1至2年），以及COVID-19感染干擾了測量。此外，研究沒有對照組，而10至15歲的男孩本來就預期會退化，因此功能結果無法顯示細胞是否產生了任何差異，無論是正面還是負面。

背景資訊：

作者沒有聲稱這些細胞會變成肌肉。根據他們的小鼠研究，他們提出細胞會釋放保護因子：XCL1（淋巴細胞趨化蛋白），他們報告其可保護肌肉細胞免於程序性細胞死亡；以及MMP-1，他們報告其可減少肌肉疤痕。他們主張第3代細胞比許多產品所用的較後代細胞更有效力，在培養中也較不易老化，這就是他們的劑量低於其他MSC試驗的原因。

作者指出，短暫發燒是細胞輸注最常見的副作用，並將其部分歸因於載體液體。他們使用自己的無異種成分配方，在六名男孩中沒有記錄到發燒。由於參與者很少，無法從這一觀察得出結論。

細胞由ENCell Co., Ltd.提供，該公司是該產品的開發者。論文表示，贊助方在解讀資料或撰寫報告方面沒有任何角色，作者聲明沒有利益衝突。資金來自韓國政府健康研究補助金和三星醫療中心。